Povzetek
Vnos AuNR in PPTT lahko vpliva na povezavo med citoskeletom in celico, s čimer zavira kolektivno migracijo rakavih celic. Motnje aktinskega citoskeleta so nadalje opazovali s STORM z uporabo superločljivostnega mikroskopa, medtem ko je bil drug mikroskop uporabljen za snemanje DIC slik v poskusih s povečavo (do 200x). Rezultati so pokazali, da lahko AuNR, usmerjeni na integrin, in interakcije med celicami sprožijo spremembe fosforilacije. Spremembe v njihovi morfologiji ali ravneh izražanja, ki so ključne komponente citoskeletnih filamentov in celičnih povezav, prav tako zavirajo migracijo tumorja.

Slika 1 Primerjava ločljivosti slikanja aktinskih filamentov s STORM (A) in konvencionalno fluorescenčno mikroskopijo (B).

Slika 2 Celična absorpcija, citotoksičnost in gibljivost po obdelavi z AuNR. (AB) Diferencial
Posnetki interferenčnega kontrasta (DIC) pod mikroskopom celic HeLa brez (A) in z
AuNRs@RGD po 24 urah inkubacije (B). (C) DIC slika AuNRs@RGD, porazdeljenih na območjih celičnih stikov po 24 urah inkubacije.
Analiza tehnologije slikanja
Tradicionalna fluorescenčna mikroskopija težko prebije mejo optične difrakcije, saj ne more opazovati učinka vnosa zlatih nanopalic in PPTT na celice, brez super ločljivosti pa jih je nemogoče slikati.Dhyana 95in400BSIKameri sta dve kompaktni, zmogljivi in prilagodljivi sCMOS kameri, ki sta idealni za to aplikacijo. Kameri imata različne načine delovanja, vključno z načinom odčitavanja z nizkim šumom CMS in visokodinamičnim načinom. Backshot sCMOS ne dosegajo le skoraj popolne 95-odstotne kvantne učinkovitosti, temveč imajo tudi veliko vidno polje, kot je 2". Širok spektralni odziv 200–1100 nm prispeva k izboljšanju občutljivosti in dinamičnega razpona 11 μm velikih slikovnih pik, kar druge sCMOS kamere nimajo veliko prednosti. Zato je mogoče slikanje izvajati pri nižji intenzivnosti osvetlitve in krajšem času osvetlitve v daljšem časovnem obdobju, ne da bi prišlo do fotopoškodb in fotobeljenja vzorcev.
Referenčni vir
Wu Y, Ali MRK, Dong B, Han T, Chen K, Chen J, Tang Y, Fang N, Wang F, El-Sayed MA. Fototermalna terapija z zlatimi nanopalicami spreminja celične stike in aktinsko mrežo pri zaviranju kolektivne migracije rakavih celic. ACS Nano. 25. september 2018;12(9):9279-9290. doi: 10.1021/acsnano.8b04128. Epub 27. avgust 2018. PMID: 30118603; PMCID: PMC6156989