2022/03/03Astratto
L'introduzione di AuNR e PPTT può influenzare la connessione tra citoscheletro e cellula, inibendo così la migrazione collettiva delle cellule tumorali. La disorganizzazione del citoscheletro di actina è stata ulteriormente osservata tramite STORM utilizzando un microscopio a super risoluzione, mentre un altro microscopio è stato utilizzato per registrare immagini DIC in esperimenti di ingrandimento (fino a 200x). I risultati hanno mostrato che le AuNR mirate alle integrine e le interazioni cellula-cellula possono innescare cambiamenti nella fosforilazione. Anche le modifiche nella loro morfologia o nei livelli di espressione, che sono componenti chiave dei filamenti citoscheletrici e delle connessioni cellulari, inibiscono la migrazione tumorale.
Figura 1. Confronto della risoluzione di STORM (A) e dell'imaging di microscopia a fluorescenza convenzionale (B) per i filamenti di actina.
Fig. 2 Assorbimento cellulare, citotossicità e motilità in seguito a trattamenti con AuNR. (AB) Differenziale
Immagini microscopiche a contrasto di interferenza (DIC) di cellule HeLa senza (A) e con
AuNRs@RGD dopo 24 ore di incubazione (B). (C) Immagine DIC di AuNRs@RGD distribuiti nelle aree di giunzione cellulare dopo 24 ore di incubazione.
Analisi della tecnologia di imaging
La microscopia a fluorescenza tradizionale fatica a superare il limite della diffrazione ottica, non essendo in grado di osservare l'effetto dell'introduzione di nanobastoncini d'oro e PPTT sulle cellule; senza una risoluzione elevata, è impossibile visualizzarle.Dhyana 95E400BSILe telecamere sono due telecamere sCMOS compatte, potenti e flessibili, ideali per questa applicazione. Le telecamere dispongono di diverse modalità, tra cui la modalità di lettura a basso rumore CMS e la modalità ad alta dinamica. La tecnologia sCMOS backshot non solo raggiunge un'efficienza quantica quasi perfetta del 95%, ma offre anche un ampio campo visivo di 2",86 m. L'ampia risposta spettrale di 200-1100 nm contribuisce a migliorare la sensibilità e la gamma dinamica dei pixel di grandi dimensioni da 11 µm, un vantaggio che altre telecamere sCMOS non possiedono. Pertanto, l'imaging può essere eseguito con un'intensità di illuminazione inferiore e tempi di esposizione più brevi per un periodo di tempo più lungo senza causare danni fotoindotti o fotobleaching dei campioni.
Fonte di riferimento
Wu Y, Ali MRK, Dong B, Han T, Chen K, Chen J, Tang Y, Fang N, Wang F, El-Sayed MA. La terapia fototermica con nanobastoncini d'oro altera le giunzioni cellulari e la rete di actina inibendo la migrazione collettiva delle cellule tumorali. ACS Nano. 25 settembre 2018;12(9):9279-9290. doi: 10.1021/acsnano.8b04128. Pubblicato online il 27 agosto 2018. PMID: 30118603; PMCID: PMC6156989
