Konfokalmikroskopi anvender punktscanning og en pinhole-apertur til effektivt at undertrykke lys, der er ude af fokus, og producerer optiske sektionsbilleder med høj kontrast, der kan rekonstrueres til tredimensionelle datasæt. Det er et kraftfuldt værktøj til billeddannelse af tykke vævsskiver og 3D-cellestrukturer, hvilket giver forskere mulighed for at udforske rumlige relationer og cellulære fordelinger.

Traditionelle punktscanningssystemer er imidlertid afhængige af fotomultiplikatorrør til fluorescensdetektion, hvilket begrænser optagelseshastigheden og evnen til at indfange hurtige dynamiske begivenheder. For at imødegå disse begrænsninger blev der udviklet konfokalmikroskopi med roterende disk. Ved at anvende flere hurtigtscannende laserstråler og en roterende pinhole-skive opnår roterende disksystemer højhastighedsoptisk sektionering, mens fluorescens detekteres med kameraer som sCMOS eller EMCCD. Denne tilgang muliggør samtidig optagelse af store synsfelter med minimal fototoksicitet, hvilket gør den særligt velegnet til live-cell-billeddannelse og hurtige 3D-eksperimenter.