22.3.2003Abstrakti
AuNR:ien ja PPTT:n lisääminen voi vaikuttaa sytoskeletonin ja solun väliseen yhteyteen, estäen siten syöpäsolujen kollektiivista migraatiota. Aktiinisytoskeletonin häiriintymistä havaittiin edelleen STORM-tekniikalla käyttäen superresoluutiomikroskooppia, kun taas toisella mikroskoopilla tallennettiin DIC-kuvia suurennuskokeissa (jopa 200x). Tulokset osoittivat, että integriiniin kohdennetut AuNR:t ja solujen väliset vuorovaikutukset voivat laukaista fosforylaatiomuutoksia. Muutokset niiden morfologiassa tai ilmentymistasoissa, jotka ovat sytoskeleton filamenttien ja soluyhteyksien keskeisiä komponentteja, estävät myös kasvainten migraatiota.
Kuva 1. STORM-kuvantamisen (A) ja perinteisen fluoresenssimikroskopiakuvantamisen (B) resoluution vertailu aktiinifilamenteille.
Kuva 2. Solujen sisäänotto, sytotoksisuus ja liikkuvuus AuNR-käsittelyjen jälkeen. (AB) Differentiaali
HeLa-solujen interferenssikontrastimikroskooppikuvat (DIC) ilman (A) ja
AuNRs@RGD 24 tunnin inkuboinnin jälkeen (B). (C) DIC-kuva AuNRs@RGD:n jakautumisesta solujen liitoskohdissa 24 tunnin inkuboinnin jälkeen.
Kuvantamistekniikan analyysi
Perinteistä fluoresenssimikroskopiaa on vaikea rikkoa optisen diffraktion rajoja, koska sillä ei voida havaita kultaisten nanorodien ja PPTT:n lisäämisen vaikutusta soluihin. Ilman superresoluutiota niitä on mahdotonta kuvata.Dhyana 95ja400BSIKamerat ovat kaksi kompaktia, tehokasta ja joustavaa sCMOS-kameraa, jotka sopivat ihanteellisesti tähän sovellukseen. Kameroissa on useita eri tiloja, mukaan lukien CMS:n matalakohinainen lukutila ja korkea dynaaminen tila. Takaisinshot-sCMOS-kamerat eivät ainoastaan saavuta lähes täydellistä 95 %:n kvanttihyötysuhdetta, vaan niillä on myös laaja näkökenttä, kuten 2 tuumaa. Laaja spektrivaste, 200–1100 nm, parantaa 11 µm:n suurten pikseleiden herkkyyttä ja dynaamista aluetta, mitä muilla sCMOS-kameroilla ei ole paljonkaan etuja. Siksi kuvantaminen voidaan suorittaa alhaisemmalla valaistusvoimakkuudella ja lyhyemmällä valotusajalla pidemmän ajan kuluessa aiheuttamatta näytteiden fotovaurioita tai fotovalkaisua.
Viitelähde
Wu Y, Ali MRK, Dong B, Han T, Chen K, Chen J, Tang Y, Fang N, Wang F, El-Sayed MA. Kultaisen nanorodin fototerminen hoito muuttaa solujen liitoskohtia ja aktiiniverkostoa estäen syöpäsolujen kollektiivista migraatiota. ACS Nano. 25. syyskuuta 2018;12(9):9279-9290. doi: 10.1021/acsnano.8b04128. Epub 27. elokuuta 2018. PMID: 30118603; PMCID: PMC6156989
