La microscopie confocale utilise le balayage de points et un diaphragme à sténopé pour supprimer efficacement la lumière hors foyer, produisant ainsi des images de coupes optiques à contraste élevé qui peuvent être reconstruites en ensembles de données tridimensionnelles. C'est un outil puissant pour l'imagerie de coupes de tissus épais et de structures cellulaires 3D, permettant aux chercheurs d'explorer les relations spatiales et la distribution cellulaire.

Cependant, les systèmes de microscopie confocale à balayage ponctuel classiques utilisent des tubes photomultiplicateurs pour la détection de la fluorescence, ce qui limite la vitesse d'acquisition et la capacité à capturer des événements dynamiques rapides. Pour pallier ces limitations, la microscopie confocale à disque rotatif a été développée. Grâce à l'utilisation de plusieurs faisceaux laser à balayage rapide et d'un disque à sténopé rotatif, les systèmes à disque rotatif réalisent une section optique à haute vitesse tout en détectant la fluorescence à l'aide de caméras telles que les sCMOS ou les EMCCD. Cette approche permet l'acquisition simultanée de grands champs de vision avec une phototoxicité minimale, la rendant particulièrement adaptée à l'imagerie de cellules vivantes et aux expériences 3D rapides.