imagerie microscopique

Fluorescence de molécule unique

Défis liés à l'application

L'imagerie de fluorescence à molécule unique détecte l'émission de molécules individuelles pour révéler leurs comportements structuraux et dynamiques, s'affranchissant des limitations des mesures d'ensemble qui masquent l'hétérogénéité moléculaire. Cette technique intègre plusieurs modalités d'imagerie — dont la microscopie confocale à balayage ponctuel, la TIRF, le FRET et la PALM/STORM — pour élucider des processus moléculaires essentiels tels que le repliement des protéines, le trafic des récepteurs et la dynamique des acides nucléiques, et est devenue un outil indispensable en recherche en sciences de la vie.

Étant donné que les signaux de molécules uniques sont intrinsèquement faibles, les expériences imposent des exigences rigoureuses et diversifiées au système d'imagerie :

● La microscopie confocale à balayage de points met l'accent sur la suppression du bruit de fond et utilise généralement des détecteurs PMT ou GaAsP pour l'acquisition du signal.

● Les techniques de super-résolution telles que PALM et STORM s'appuient sur des caméras à haut rendement quantique et à faible bruit pour obtenir une acquisition de signal à l'échelle de la milliseconde et une précision de localisation au niveau nanométrique.

● Les techniques TIRF, FRET et de suivi de molécules uniques exigent une imagerie à rapport signal/bruit élevé en faible luminosité, tout en capturant des dynamiques à l'échelle de la milliseconde. Ces applications nécessitent également de minimiser le photoblanchiment et la phototoxicité, ce qui impose des exigences élevées en matière de sensibilité, de vitesse et de stabilité de la caméra.

molécule unique
Image de la caméra scmos Aries 6510 Tucsen

Bélier 6510

Caméra sCMOS BSI grand format 6,5 µm

Rendement quantique : QE maximal jusqu’à 95 %, capacité de détection proche du photon unique (bruit de lecture < 0,7 e⁻)
Zone du capteur et résolution : zone d’imagerie de 29,4 mm, résolution de 10,2 MP, lecture plein format jusqu’à 150 images/s.

Taille des pixels : 6,5 µm, polyvalente pour de multiples grossissements.

Modes de lecture : Plusieurs modes de lecture pour des performances optimisées.

Interface : Interface GigE haut débit.

Refroidissement : Le refroidissement par air pulsé minimise la dérive du bruit et assure une imagerie quantitative stable.

Dhyana 400BSI V3 800x600

Dhyana 400BSI V3

Caméra sCMOS BSI à grands pixels de 16 μm

Les pixels de 16 μm offrent une efficacité de collecte de photons environ 6 fois supérieure à celle des pixels de 6,5 μm, améliorant considérablement la sensibilité à la faible luminosité. Un bruit de lecture ultra-faible (~0,9 e⁻) et un rendement quantique pouvant atteindre 90 % permettent la détection de photons uniques.
Un refroidissement poussé jusqu'à 60 °C en dessous de la température ambiante réduit efficacement le courant d'obscurité et améliore le rapport signal/bruit.
Sa capacité de puits de potentiel élevée (~74 ke⁻) permet la mesure simultanée de signaux forts et faibles dans des champs lumineux complexes.
Les modes de lecture HDR et à faible bruit permettent une commutation flexible entre les scénarios d'imagerie à haute dynamique et à faible luminosité.
Un refroidissement fiable et stable minimise la dérive des données et améliore la précision des mesures.

Bélier 16

Bélier 16

Caméra sCMOS BSI à grands pixels de 16 μm

Les pixels de 16 μm offrent une efficacité de collecte de photons environ 6 fois supérieure à celle des pixels de 6,5 μm, améliorant considérablement la sensibilité à la faible luminosité. Un bruit de lecture ultra-faible (~0,9 e⁻) et un rendement quantique pouvant atteindre 90 % permettent la détection de photons uniques.
Un refroidissement poussé jusqu'à 60 °C en dessous de la température ambiante réduit efficacement le courant d'obscurité et améliore le rapport signal/bruit.
Sa capacité de puits de potentiel élevée (~74 ke⁻) permet la mesure simultanée de signaux forts et faibles dans des champs lumineux complexes.
Les modes de lecture HDR et à faible bruit permettent une commutation flexible entre les scénarios d'imagerie à haute dynamique et à faible luminosité.
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