22/03/03Astratto
L'introduzione di AuNR e PPTT può influenzare la connessione tra citoscheletro e cellula, inibendo così la migrazione collettiva delle cellule tumorali. L'alterazione del citoscheletro di actina è stata ulteriormente osservata da STORM utilizzando un microscopio a superrisoluzione, mentre un altro microscopio è stato utilizzato per registrare immagini DIC in esperimenti di ingrandimento (fino a 200x). I risultati hanno mostrato che le AuNR mirate all'integrina e le interazioni cellula-cellula potrebbero innescare cambiamenti nella fosforilazione. Anche i cambiamenti nella loro morfologia o nei livelli di espressione, che sono componenti chiave dei filamenti del citoscheletro e delle connessioni cellulari, inibiscono la migrazione tumorale.
Fig. 1 Confronto tra la risoluzione dell'imaging STORM (A) e quello della microscopia a fluorescenza convenzionale (B) per i filamenti di actina.
Fig. 2 Assorbimento cellulare, citotossicità e motilità dopo trattamenti con AuNRs. (AB) Differenziale
immagini microscopiche a contrasto di interferenza (DIC) delle cellule HeLa senza (A) e con
AuNRs@RGD dopo 24 ore di incubazione (B). (C) Immagine DIC della distribuzione di AuNRs@RGD nelle aree di giunzione cellulare dopo 24 ore di incubazione.
Analisi della tecnologia di imaging
La microscopia a fluorescenza tradizionale ha difficoltà a superare il limite della diffrazione ottica, non è in grado di osservare l'effetto dell'introduzione di nanobastoncini d'oro e PPTT sulle cellule e, senza super risoluzione, è impossibile riprodurne l'immagine.Dhyana 95E400BSILe telecamere sCMOS sono due telecamere sCMOS compatte, potenti e flessibili, ideali per questa applicazione. Le telecamere offrono diverse modalità, tra cui la modalità di lettura CMS a basso rumore e la modalità ad alta dinamica. Le telecamere sCMOS Backshot non solo raggiungono un'efficienza quantica quasi perfetta del 95%, ma offrono anche un ampio campo visivo, come 2". L'ampia risposta spettrale di 200-1100 nm contribuisce a migliorare la sensibilità e la gamma dinamica dei pixel di grandi dimensioni da 11 µm, caratteristiche che altre telecamere sCMOS non offrono. Pertanto, l'imaging può essere eseguito con un'intensità di illuminazione inferiore e tempi di esposizione più brevi per un periodo di tempo più lungo, senza causare fotodanneggiamento e fotobleaching dei campioni.
Fonte di riferimento
Wu Y, Ali MRK, Dong B, Han T, Chen K, Chen J, Tang Y, Fang N, Wang F, El-Sayed MA. La terapia fototermica con nanobastoncini d'oro altera le giunzioni cellulari e la rete di actina inibendo la migrazione collettiva delle cellule tumorali. ACS Nano. 25 settembre 2018; 12 (9): 9279-9290. doi: 10.1021/acsnano.8b04128. Epub 27 agosto 2018. PMID: 30118603; PMCID: PMC6156989
