Microscopia confocală folosește scanarea punctuală și o diafragmă tip orificiu de ac pentru a suprima eficient lumina nefocalizată, producând imagini cu secțiuni optice cu contrast ridicat, care pot fi reconstruite în seturi de date tridimensionale. Este un instrument puternic pentru imagistica feliilor groase de țesut și a structurilor celulare 3D, permițând cercetătorilor să exploreze relațiile spațiale și distribuțiile celulare.

Cu toate acestea, sistemele tradiționale de scanare punctuală se bazează pe tuburi fotomultiplicatoare pentru detectarea fluorescenței, ceea ce limitează viteza de achiziție și capacitatea de a capta evenimente dinamice rapide. Pentru a aborda aceste limitări, a fost dezvoltată microscopia confocală cu disc rotativ. Prin utilizarea mai multor fascicule laser cu scanare rapidă și a unui disc rotativ cu orificiu de stenop, sistemele cu disc rotativ realizează secționare optică de mare viteză, detectând în același timp fluorescența cu camere precum sCMOS sau EMCCD. Această abordare permite achiziția simultană a unor câmpuri vizuale largi cu fototoxicitate minimă, ceea ce o face deosebit de potrivită pentru imagistica celulelor vii și experimente 3D rapide.