22/03/03Рэзюмэ
Каб вывучыць лакалізацыю і арыентацыю бялкоў у субклеткавых структурах, Пэн Сі і яго калегі распрацавалі мікраскапію палярызаванага структураванага святла (pSIM). Даследаванне апублікавана ў часопісе Nature Communications.
Гэтая праца «ўзмацняе» існуючую сістэму SIM, глыбока даследуючы патэнцыйныя характарыстыкі тэхналогіі SIM і камерцыйных прыбораў, а таксама раскрывае ўласцівыя характарыстыкі выяўлення палярызацыі існуючай сістэмы SIM, якія нават яе вынаходнікі не заўважылі, так што існуючая сістэма можа рэалізаваць функцыю палярызацыйнай SIM без якіх-небудзь мадыфікацый. Гэта дазваляе многім біялагічным лабараторыям з сістэмамі SIM непасрэдна аналізаваць палярызацыйную SIM, што значна прасуне даследаванні палярызацыйнай візуалізацыі з высокім разрозненнем.
Мал. 1. Візуалізацыя арыентацыі кароткіх актынавых філаментаў. a Дынамічная візуалізацыя руху актынавага філамента, пазначанага фалаідынам, пад уздзеяннем міязіну. Белая рамка змяшчае траекторыю кароткага актынавага філамента. b Павялічаны выгляд вобласці ў жоўтай рамцы на малюнку a. Дыпольныя арыентацыі актынавых філаментаў змяняюцца па меры іх руху. c Арыентацыя і становішча фрагментаванага актына на малюнку b. d 2D-pSIM-візуалізацыя актынавых філаментаў у нейронах гіпакампа, якая выразна адрознівае бесперапынныя доўгія актынавыя філаменты ў дендрыце ад вобласці дыскрэтнай структуры актынавага кольца ў аксоне. e Яшчэ адна ілюстрацыя структуры актынавага кольца ў аксоне. f, g Павялічаныя віды абласцей у рамцы d, якія параўноўваюць вынікі візуалізацыі PM і pSIM. h Профіль інтэнсіўнасці лініі, пазначанай на малюнку e, пераўтварэнне Фур'е (i) якой паказвае перыядычнасць 184 нм, што адпавядае раней апублікаваным вынікам. j, k Структура актынавага кольца мае вырашальнае значэнне для перыядычнага шкілета, звязанага з мембранай (MPS), у нейронах. Папярэдняя мадэль мяркуе арганізацыю актынавых філаментаў, пакрытых аддуцынам, "канец у канец". Аднак pSIM паказвае, што арыентацыя кароткіх актынавых філаментаў паралельная стрыжню аксона, што падтрымлівае арганізацыю актынавых кольцавых структур побач. Маштабныя палоскі: a 2 мкм і d–g 1 мкм
Аналіз тэхналогіі візуалізацыі
Аптычная сістэма візуалізацыі з высокім разрозненнем QSIM — гэта тыповая сістэма візуалізацыі пры слабым асвятленні. TUCSENДх'яна 400BSIКамера мае пікавую квантавую эфектыўнасць 95% і шум счытвання да 1,2e-, што дазваляе сістэме атрымання выяваў з высокім суадносінамі сігнал/шум пры слабым асвятленні. Піксель памерам 6,5 мкм падыходзіць для аб'ектыва з вялікім павелічэннем 60x. Гэта дазваляе ў поўнай меры выкарыстоўваць перавагі раздзяляльнай здольнасці аб'ектыва і дапамагаць сістэме атрымліваць выявы з высокім разрозненнем і выразнымі дэталямі.
Спасылка на крыніцу
Zhanghao K, Chen X, Liu W, Liu M, Liu Y, Wang Y, Luo S, Wang X, Shan C, Xie H, Gao J, Chen X, Jin D, Li X, Zhang Y, Dai Q, Xi P. Візуалізацыя флуарэсцэнтных дыполяў з высокім разрозненнем з дапамогай палярызаванай структураванай асвятляльнай мікраскапіі. Nat Commun. 16 кастрычніка 2019 г.;10(1):4694. doi: 10.1038/s41467-019-12681-w. PMID: 31619676; PMCID: PMC6795901.
