22. 3. 2003Abstraktní
Aby Peng Xi a jeho kolegové mohli studovat lokalizaci a orientaci proteinů v subcelulárních strukturách, vyvinuli mikroskopii s polarizovaným strukturovaným světlem (pSIM). Studie je publikována v časopise Nature Communications.
Tato práce „posílí“ stávající SIM systém hlubokým zkoumáním potenciálních vlastností SIM technologie a komerčních přístrojů a odhalí inherentní charakteristiky detekce polarizace stávajícího SIM systému, kterých si nevšimli ani jeho vynálezci, takže stávající systém může realizovat funkci polarizační SIM bez jakýchkoli úprav. To umožňuje mnoha biologickým laboratořím se SIM systémy přímo analyzovat polarizační SIM, což výrazně posune výzkum polarizačního zobrazování s vysokým rozlišením.
Obr. 1 Zobrazení orientace krátkých aktinových filament. a Dynamické zobrazení pohybu aktinového filamentu značeného faloidinem, řízeného myosinem. Bílý rámeček obsahuje trajektorii krátkého aktinového filamentu. b Zvětšený pohled na žlutě ohraničenou oblast v bodě a. Dipólové orientace aktinových filament se mění s jejich pohybem. c Časosběrné snímání orientace a polohy fragmentovaného aktinu v bodě b. d 2D-pSIM zobrazení aktinových filament v hipokampálních neuronech, které jasně rozlišuje mezi spojitými dlouhými aktinovými filamenty v dendritu a oblastí diskrétní aktinové kruhové struktury v axonu. e Další ilustrace aktinové kruhové struktury v axonu. f, g Zvětšené pohledy na ohraničené oblasti v bodě d, které porovnávají výsledky PM a pSIM zobrazování. h Profil intenzity čáry uvedené v bodě e, jejíž Fourierova transformace (i) ukazuje periodicitu 184 nm, což je v souladu s dříve publikovanými výsledky. j, k Struktura aktinového kruhu je klíčová pro membránově asociovaný periodický skelet (MPS) v neuronech. Předchozí model předpokládá uspořádání aktinových filament s adducinem zakončeným koncem typu end-to-end. Model pSIM však ukazuje, že orientace krátkých aktinových filament je rovnoběžná s dříkem axonu, což podporuje uspořádání aktinových kruhových struktur vedle sebe. Měřítka: a 2 μm a d–g 1 μm
Analýza zobrazovací technologie
Optický systém QSIM s vysokým rozlišením je typickým systémem pro zobrazování za slabého osvětlení. TUCSENDhyana 400BSIKamera má maximální kvantovou účinnost 95 % a nízký šum při čtení, a to až 1,2e-, což umožňuje systému s nízkým osvětlením získat snímky s vysokým poměrem signálu k šumu. Pixel o velikosti 6,5 μm je vhodný pro objektiv s vysokým zvětšením 60x. Dokáže plně využít výhod rozlišení objektivu a pomoci systému získat snímky s vysokým rozlišením a jasnými detaily.
Zdroj odkazu
Zhanghao K, Chen X, Liu W, Li M, Liu Y, Wang Y, Luo S, Wang X, Shan C, Xie H, Gao J, Chen X, Jin D, Li X, Zhang Y, Dai Q, Xi P. Zobrazování fluorescenčních dipólů s vysokým rozlišením pomocí polarizované strukturované iluminační mikroskopie. Nat Commun. 16. října 2019;10(1):4694. doi: 10.1038/s41467-019-12681-w. PMID: 31619676; PMCID: PMC6795901.
