pSIM-Bildgebung – Superopléisend Bildgebung vu fluoreszenten Dipole iwwer polariséiert strukturell Beliichtungsmikroskopie.

Zäit22/03/03

Abstrakt

Fir d'Lokalisatioun an d'Orientéierung vu Proteinen an subzelluläre Strukturen ze studéieren, hunn de Peng Xi a seng Kollegen eng polariséiert strukturéiert Liichtmikroskopie (pSIM) entwéckelt. D'Studie ass an der Zäitschrëft Nature Communications publizéiert.

Dës Aarbecht "stäerkt" dat existent SIM-System andeems et déi potenziell Charakteristike vun der SIM-Technologie a kommerziellen Instrumenter grëndlech ënnersicht, an déi inherent Polarisatiounsdetektiounscharakteristike vum existente SIM-System ausgrueft, déi souguer seng Erfinder net gemierkt hunn, sou datt dat existent System d'Funktioun vum Polarisatiouns-SIM ouni Modifikatioun ëmsetze kann. Dëst erméiglecht et ville Liewenswëssenschaftslaboratoiren mat SIM-Systemer, d'Polarisatiouns-SIM direkt z'analyséieren, wat d'Fuerschung vun der Polarisatiouns-Superopléisungsbiller staark virubrénge wäert.

1

Fig.1 Bildgebung vun der Orientéierung vu kuerzen Aktinfilamenter. a Dynamesch Bildgebung vun der Myosin-gedriwwener Bewegung vum Phalloidin-markéierten Aktinfilament. Déi wäiss Këscht enthält d'Trajektorie vun engem kuerzen Aktinfilament. b Vergréissert Vue vun der gieler Këschtregioun an a. D'Dipolorientéierunge vun den Aktinfilamenter änneren sech wann se sech beweegen. c Zäitlaf-Orientéierung a Positioun vum fragmentéierten Aktin a b. d 2D-pSIM-Bildgebung vun den Aktinfilamenter an Hippocampusneuronen, déi kloer tëscht de kontinuéierleche laangen Aktinfilamenter am Dendrit an der Regioun vun der diskreter Aktinringstruktur am Axon ënnerscheet. e Eng aner Illustratioun vun der Aktinringstruktur am Axon. f, g Vergréissert Vue vun de Këschtregiounen an d, déi d'Resultater vun der PM- an der pSIM-Bildgebung vergläichen. h Den Intensitéitsprofil vun der Linn, déi an e uginn ass, där hir Fourier-Transformatioun (i) eng Periodizitéit vun 184 nm weist, wat mat de virdru gemellten Resultater iwwereneestëmmt. j, k D'Aktinringstruktur ass entscheedend fir de membranassoziéierte periodesche Skelett (MPS) an Neuronen. Dat viregt Modell geet vun enger End-to-End Organisatioun fir d'Adducin-gekappte Aktinfilamenter aus. pSIM weist awer, datt d'Orientéierung vun de kuerzen Aktinfilamenter parallel zum Axonschaft ass, wat eng Säit-un-Säit Organisatioun fir d'Aktinringstrukturen ënnerstëtzt. Skalabalken: a 2 μm an d-g 1 μm

Analyse vun der Bildgebungstechnologie

Den QSIM Super-Resolutiouns-Bildgebungssystem ass en typescht Bildgebungssystem bei schwaachem Liicht. Den TUCSENDhyana 400BSID'Kamera huet eng maximal Quanteeffizienz vun 95% an e Liesrauschen vun nëmmen 1,2e-, wat dem System bei schwaachem Liicht hëllefe kann, Biller mat engem héije Signal-Rauschen-Verhältnis ze kréien. De Pixel vu 6,5 μm ass gëeegent fir 60x héichleeschtungsfäeg Objektiver. Et kann d'Virdeeler vun der Objektivopléisung voll ausnotzen an dem System hëllefen, héichopléisend Biller mat kloren Detailer ze kréien.

Referenzquell

Zhanghao K, Chen X, Liu W, Li M, Liu Y, Wang Y, Luo S, Wang X, Shan C, Xie H, Gao J, Chen X, Jin D, Li X, Zhang Y, Dai Q, Xi P. Super-Opléisungsbildgebung vu fluoreszenten Dipolen iwwer polariséiert strukturell Beliichtungsmikroskopie. Nat Commun. 16. Oktober 2019;10(1):4694. doi: 10.1038/s41467-019-12681-w. PMID: 31619676; PMCID: PMC6795901.

Präisser an Optiounen

TopPointer
CodePointer
uruffen
Online Clientsservice
ënneschtenZeiger
floatCode

Präisser an Optiounen