22/03/03Soyut
Peng Xi ve meslektaşları, hücre altı yapılarda proteinlerin lokalizasyonunu ve yönelimini incelemek için polarize yapılandırılmış ışık mikroskobu (pSIM) geliştirdiler. Çalışma Nature Communications dergisinde yayımlandı.
Bu çalışma, SIM teknolojisinin ve ticari cihazların potansiyel özelliklerini derinlemesine inceleyerek mevcut SIM sistemini "güçlendiriyor" ve mucitlerinin bile fark etmediği mevcut SIM sisteminin içsel polarizasyon algılama özelliklerini ortaya çıkarıyor, böylece mevcut sistem herhangi bir değişiklik yapmadan polarizasyon SIM'inin işlevini gerçekleştirebiliyor. Bu, SIM sistemlerine sahip birçok yaşam bilimleri laboratuvarının polarizasyon SIM'ini doğrudan analiz etmesini sağlayarak polarizasyon süper çözünürlüklü görüntüleme araştırmalarını büyük ölçüde ilerletecektir.
Şekil 1. Kısa aktin filamentlerinin yöneliminin görüntülenmesi. a Faloidinle işaretlenmiş aktin filamentinin miyozin tarafından yönlendirilen hareketinin dinamik görüntülenmesi. Beyaz kutu, kısa bir aktin filamentinin yörüngesini içerir. b a'daki sarı kutulu bölgenin büyütülmüş görünümü. Aktin filamentlerinin dipol yönelimleri hareket ettikçe değişir. c b'deki parçalanmış aktinin zaman atlamalı yönelimi ve konumu. d Hipokampal nöronlardaki aktin filamentlerinin 2B-pSIM görüntülemesi, dendritteki sürekli uzun aktin filamentleri ile aksondaki ayrı aktin halka yapısı bölgesini açıkça ayırt eder. e Aksondaki aktin halka yapısının bir başka çizimi. f, g PM ve pSIM görüntüleme sonuçlarını karşılaştıran d'deki kutulu bölgelerin büyütülmüş görünümleri. h Daha önce bildirilen sonuçlarla tutarlı olarak, Fourier dönüşümü (i) 184 nm periyodiklik gösteren, e'de belirtilen çizginin yoğunluk profili. j, k Aktin halka yapısı, nöronlardaki zarla ilişkili periyodik iskelet (MPS) için kritik öneme sahiptir. Önceki model, addusin başlıklı aktin filamentleri için uçtan uca bir organizasyon varsayar. Ancak pSIM, kısa aktin filamentlerinin yöneliminin akson şaftına paralel olduğunu ve aktin halka yapıları için yan yana bir organizasyonu desteklediğini ortaya koymaktadır. Ölçek çubukları: a 2 μm ve d–g 1 μm
Görüntüleme teknolojisinin analizi
QSIM süper çözünürlüklü görüntüleme optik sistemi, tipik bir düşük ışık görüntüleme sistemidir. TUCSENDhyana 400BSIKameranın %95'lik bir tepe kuantum verimliliği ve 1,2e- kadar düşük okuma gürültüsü vardır; bu da düşük ışık koşullarında sistemin yüksek sinyal-gürültü oranlı görüntüleme görüntüleri elde etmesine yardımcı olabilir. 6,5 μm piksel, 60x yüksek güçlü objektif lensler için uygundur. Lens çözünürlüğünün avantajlarından tam olarak yararlanabilir ve sistemin net ayrıntılara sahip yüksek çözünürlüklü görüntüler elde etmesine yardımcı olabilir.
Referans kaynağı
Zhanghao K, Chen X, Liu W, Li M, Liu Y, Wang Y, Luo S, Wang X, Shan C, Xie H, Gao J, Chen X, Jin D, Li X, Zhang Y, Dai Q, Xi P. Polarize yapılandırılmış aydınlatma mikroskobu ile floresan dipollerin süper çözünürlüklü görüntülenmesi. Nat Commun. 2019 Ekim 16;10(1):4694. doi: 10.1038/s41467-019-12681-w. PMID: 31619676; PMCID: PMC6795901.
