22/03/04Περίληψη
Το DYRK1A είναι ένα σημαντικό γονίδιο που προκαλεί το σύνδρομο Down (DS). Η μειωμένη συχνότητα εμφάνισης συμπαγών όγκων όπως το νευροβλάστωμα σε ασθενείς με DS και οι αυξημένες αγγειακές ανωμαλίες σε έμβρυα με DS υποδηλώνουν έναν πιθανό ρόλο του DYRK1A στις αγγειογενετικές διεργασίες, αλλά τα in vivo στοιχεία είναι ακόμη ελάχιστα.
Εδώ, οι ερευνητές χρησιμοποίησαν έμβρυα μεταλλαγμένου γονιδίου dyrk1aa του ψαριού zebra για να κατανοήσουν τη λειτουργία του DYRK1A στον σχηματισμό της εγκεφαλικής αγγείωσης. Τα μεταλλαγμένα γονίδια dyrk1aa του ψαριού zebra εμφάνισαν εγκεφαλική αιμορραγία και ελαττώματα στην αγγειογένεση των κεντρικών αρτηριών στον αναπτυσσόμενο οπίσθιο εγκέφαλο. Συνολικά, τα αποτελέσματα υποδηλώνουν ότι το DYRK1A παίζει ουσιαστικό ρόλο στην αγγειογένεση και στη διατήρηση της αναπτυσσόμενης εγκεφαλικής αγγείωσης μέσω της ρύθμισης της σηματοδότησης ασβεστίου, η οποία μπορεί να έχει θεραπευτικό δυναμικό για αγγειακές παθήσεις που σχετίζονται με το DYRK1A.
Σχήμα 1, το dyrk1ab εκφράζεται στην αναπτυσσόμενη περιοχή του εγκεφάλου. Με WISH (whole mount in situhybridization), το dyrk1ab εκφράστηκε στον πρόσθιο εγκέφαλο (μαύρες κεφαλές βελών, af· μαύρες αγκύλες, gl), στον μεσεγκέφαλο (γκρι κεφαλές βελών, af· γκρι αγκύλες, gl), στον οπίσθιο εγκέφαλο (μπλε κεφαλές βελών, af· μπλε αγκύλες, gl) στα 24, 48 και 72 hpf και στον νωτιαίο μυελό (πορτοκαλί κεφαλές βελών, a και b) στα 24 hpf. Ανιχνεύτηκε επίσης στην καρδιά (αστερίσκοι, d, f, j και l) και στον αμφιβληστροειδή (κόκκινα βέλη, il) στα 48 και 72 hpf. (m και n) Οι εικόνες σε τομή των εμβρύων WISH έδειξαν την έκφραση του dyrk1ab στο οπίσθιο τμήμα (πράσινα βέλη) και στον αμφιβληστροειδή (κόκκινα βέλη) στα 48 hpf και 72 hpf.
Ανάλυση της τεχνολογίας απεικόνισης
Το πείραμα πρέπει να απεικονίσει το μεταλλαγμένο γονίδιο του ψαριού ζέβρα, κάτι που απαιτεί η κάμερα να έχει καλή ευαισθησία για τη μείωση του χρόνου έκθεσης και ένα αρκετά μεγάλο οπτικό πεδίο για τη συλλογή περισσότερων δεδομένων για το πείραμα. Ο θόρυβος ανάγνωσης τουΝτιάνα 400DCΗ κάμερα έχει μόνο 2 ηλεκτρόνια. Το σταθερό φαινόμενο ψύξης στους -10℃ μπορεί να ελέγξει σημαντικά το σκοτεινό ρεύμα και να βελτιώσει την αναλογία σήματος προς θόρυβο. Το μέγεθος 1,2" παρέχει μεγαλύτερο οπτικό πεδίο για τον παρατηρητή του μικροσκοπίου, μειώνει τον αριθμό των εικόνων και τον χρόνο λήψης και παρέχει εξαιρετική υποστήριξη απεικόνισης για έρευνα.
Πηγή αναφοράς
Cho, HJ, Lee, JG, Kim, JH, Kim, SY, Huh, YH, Kim, HJ, Lee, KS, Yu, K., & Lee, JS (2019). Τα αγγειακά ελαττώματα των νοκ-άουτ DYRK1A βελτιώνονται με τη ρύθμιση της σηματοδότησης ασβεστίου στο ψάρι-ζέβρα. Μοντέλα και μηχανισμοί ασθενειών, 12(5), dmm037044. https://doi.org/10.1242/dmm.037044
