22.3.2004Abstrakti
DYRK1A on merkittävä Downin oireyhtymän (DS) aiheuttava geeni. Kiinteiden kasvainten, kuten neuroblastooman, vähentynyt esiintyvyys DS-potilailla ja verisuonipoikkeavuuksien lisääntyminen DS-sikiöillä viittaavat DYRK1A:n mahdolliseen rooliin angiogeenisissä prosesseissa, mutta in vivo -näyttöä on vielä niukasti.
Tässä tutkimuksessa tutkijat käyttivät seeprakalojen dyrk1aa-mutanttialkioita ymmärtääkseen DYRK1A:n toimintaa aivoverisuoniston muodostumisessa. Seeprakalojen dyrk1aa-mutanteilla havaittiin aivoverenvuotoa ja angiogeneesin häiriöitä kehittyvien takaaivojen keskusvaltimoissa. Yhdessä tulokset viittaavat siihen, että DYRK1A:lla on olennainen rooli angiogeneesissä ja kehittyvän aivoverisuoniston ylläpidossa kalsiumsignaloinnin säätelyn kautta, millä voi olla terapeuttista potentiaalia DYRK1A:han liittyviin verisuonisairauksiin.
Kuvassa 1 esitettyä dyrk1ab:tä ilmentyy kehittyvillä aivoalueilla. WISH-menetelmällä (whole mount in situ -hybridisaatio) dyrk1ab:tä ilmentyi etuaivoissa (mustat nuolenkärjet, af; mustat sulkumerkit, gl), keskiaivoissa (harmaat nuolenkärjet, af; harmaat sulkumerkit, gl), takaaivoissa (siniset nuolenkärjet, af; siniset sulkumerkit, gl) 24, 48 ja 72 hv:n nopeudella sekä selkäytimessä (oranssit nuolenkärjet, a ja b) 24 hv:n nopeudella. Sitä havaittiin myös sydämessä (tähdet, d, f, j ja l) ja verkkokalvolla (punaiset nuolet, il) 48 ja 72 hv:n nopeudella. (m ja n) WISH-alkioiden leikkauskuvat osoittivat dyrk1ab:n ilmentymistä umpikalvossa (vihreät nuolet) ja verkkokalvolla (punaiset nuolet) 48 ja 72 hv:n nopeudella.
Kuvantamistekniikan analyysi
Kokeen on kuvattava seeprakalan mutanttigeeni, mikä edellyttää kameralta hyvää herkkyyttä valotusajan lyhentämiseksi ja riittävän suurta kuva-alaa, jotta kokeeseen voidaan kerätä enemmän dataa. LukemakohinaDhyana 400DCKamerassa on vain kaksi elektronia. -10 ℃:n vakaa jäähdytysvaikutus voi merkittävästi hallita pimeävirtaa ja parantaa signaali-kohinasuhdetta. 1,2 tuumaa tarjoaa mikroskoopin käyttäjälle suuremman näkökentän, vähentää kuvien määrää ja hankinta-aikaa sekä tarjoaa erinomaisen kuvantamistuen tutkimukselle.
Viitelähde
Cho, HJ, Lee, JG, Kim, JH, Kim, SY, Huh, YH, Kim, HJ, Lee, KS, Yu, K., & Lee, JS (2019). DYRK1A-geenin positiivisten verisuonivaurioiden paranemista kalsiumsignaloinnin moduloinnilla seeprakaloilla. Disease models & mechanisms, 12(5), dmm037044. https://doi.org/10.1242/dmm.037044
