22/03/03Abstracto
Para estudiar la localización y orientación de las proteínas en las estructuras subcelulares, Peng Xi y sus colegas desarrollaron la microscopía de luz estructurada polarizada (pSIM). El estudio se publicó en la revista Nature Communications.
Este trabajo potencia el sistema SIM existente explorando a fondo las características potenciales de la tecnología SIM y los instrumentos comerciales, y explora las características inherentes de detección de polarización del sistema SIM existente, que ni siquiera sus inventores habían notado, de modo que el sistema actual puede realizar la función de SIM de polarización sin ninguna modificación. Esto permite que muchos laboratorios de ciencias de la vida con sistemas SIM analicen directamente la SIM de polarización, lo que impulsará significativamente la investigación de imágenes de superresolución de polarización.
Fig. 1. Imagen de la orientación de filamentos cortos de actina. a. Imagen dinámica del movimiento impulsado por la miosina de un filamento de actina marcado con faloidina. El recuadro blanco contiene la trayectoria de un filamento corto de actina. b. Vista ampliada de la región recuadrada amarilla en a. Las orientaciones dipolares de los filamentos de actina cambian a medida que se mueven. c. Orientación y posición en time-lapse de la actina fragmentada en b. d. Imagen 2D-pSIM de los filamentos de actina en neuronas del hipocampo, que distingue claramente entre los filamentos largos y continuos de actina en la dendrita y la región de la estructura discreta del anillo de actina en el axón. e. Otra ilustración de la estructura del anillo de actina en el axón. f, g. Vistas ampliadas de las regiones recuadradas en d, que comparan los resultados de las imágenes PM y pSIM. h. Perfil de intensidad de la línea indicada en e, cuya transformada de Fourier (i) muestra una periodicidad de 184 nm, consistente con resultados previamente reportados. j, k La estructura del anillo de actina es crucial para el esqueleto periódico asociado a la membrana (SPM) en las neuronas. El modelo anterior asume una organización de extremo a extremo para los filamentos de actina cubiertos por aducina. Sin embargo, pSIM revela que la orientación de los filamentos cortos de actina es paralela al eje del axón, lo que apoya una organización en paralelo para las estructuras del anillo de actina. Barras de escala: a 2 μm y d–g 1 μm.
Análisis de la tecnología de imágenes
El sistema óptico de imágenes de superresolución QSIM es un sistema típico de imágenes con poca luz. El TUCSENDhyana 400BSILa cámara tiene una eficiencia cuántica máxima del 95 % y un ruido de lectura de tan solo 1,2 e, lo que permite que el sistema con poca luz obtenga imágenes con una alta relación señal-ruido. El píxel de 6,5 μm es adecuado para objetivos de alta potencia de 60x. Esto permite aprovechar al máximo las ventajas de la resolución del objetivo y permite que el sistema obtenga imágenes de alta resolución con detalles nítidos.
Fuente de referencia
Zhanghao K, Chen X, Liu W, Li M, Liu Y, Wang Y, Luo S, Wang X, Shan C, Xie H, Gao J, Chen X, Jin D, Li X, Zhang Y, Dai Q, Xi P. Imágenes de superresolución de dipolos fluorescentes mediante microscopía de iluminación estructurada polarizada. Nat Commun. 16 de octubre de 2019;10(1):4694. doi: 10.1038/s41467-019-12681-w. PMID: 31619676; PMCID: PMC6795901.
