Imagem pSIM – Imagem de super-resolução de dipolos fluorescentes por meio de microscopia de iluminação estruturada polarizada.

Fig. 1. Imagem da orientação de filamentos curtos de actina. a) Imagem dinâmica do movimento de um filamento de actina marcado com faloidina, impulsionado pela miosina. A caixa branca contém a trajetória de um filamento curto de actina. b) Vista ampliada da região delimitada pela caixa amarela em a. As orientações dos dipolos dos filamentos de actina mudam à medida que se movem. c) Sequência de imagens em time-lapse da orientação e posição da actina fragmentada em b. d) Imagem 2D-pSIM dos filamentos de actina em neurônios do hipocampo, que distingue claramente entre os longos filamentos contínuos de actina no dendrito e a região da estrutura discreta em anel de actina no axônio. e) Outra ilustração da estrutura em anel de actina no axônio. f, g) Vistas ampliadas das regiões delimitadas em d, que comparam os resultados das imagens PM e pSIM. h) O perfil de intensidade da linha indicada em e, cuja transformada de Fourier (i) mostra uma periodicidade de 184 nm, consistente com resultados relatados anteriormente. j, k A estrutura do anel de actina é crucial para o esqueleto periódico associado à membrana (MPS) em neurônios. O modelo anterior pressupõe uma organização ponta a ponta para os filamentos de actina com extremidades de aducina. No entanto, a pSIM revela que a orientação dos filamentos curtos de actina é paralela ao eixo do axônio, corroborando uma organização lado a lado para as estruturas do anel de actina. Barras de escala: a 2 μm e d–g 1 μm.