Imagens de super-resolução – A terapia fototérmica com nanobastões de ouro altera as junções celulares e a rede de actina, inibindo a migração coletiva de células cancerígenas.

tempo03/03/2022

Resumo

A introdução de AuNRs e PPTT pode afetar a conexão entre o citoesqueleto e a célula, inibindo assim a migração coletiva de células cancerígenas. A ruptura do citoesqueleto de actina foi observada por STORM utilizando um microscópio de super-resolução, enquanto outro microscópio foi usado para registrar imagens DIC em experimentos de ampliação (até 200x). Os resultados mostraram que AuNRs direcionados a integrinas e interações célula-célula podem desencadear alterações na fosforilação. Alterações na morfologia ou nos níveis de expressão dessas integrinas, que são componentes-chave dos filamentos do citoesqueleto e das conexões celulares, também inibem a migração tumoral.

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Figura 1. Comparação da resolução da microscopia STORM (A) e da microscopia de fluorescência convencional (B) para filamentos de actina.

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Figura 2. Captação celular, citotoxicidade e motilidade após tratamento com AuNRs. (AB) Diferencial
Imagens de microscopia de contraste de interferência (DIC) de células HeLa sem (A) e com (B)
(A) Imagem DIC de AuNRs@RGD após 24 h de incubação (B). (C) Imagem DIC de AuNRs@RGD distribuídos nas áreas de junção celular após 24 h de incubação.

Análise da tecnologia de imagem

A microscopia de fluorescência tradicional tem dificuldade em ultrapassar o limite da difração óptica, sendo incapaz de observar o efeito da introdução de nanobastões de ouro e PPTT nas células; sem super-resolução, é impossível obter imagens delas.Dhyana 95e400BSIAs câmeras Backshot são duas câmeras sCMOS compactas, potentes e flexíveis, ideais para esta aplicação. Elas possuem diversos modos, incluindo o modo de leitura de baixo ruído CMS e o modo de alta faixa dinâmica. A tecnologia sCMOS Backshot não só atinge uma eficiência quântica próxima da perfeição, de 95%, como também apresenta um amplo campo de visão, como 2”. A ampla resposta espectral de 200 a 1100 nm contribui para melhorar a sensibilidade e a faixa dinâmica dos pixels grandes de 11 µm, uma vantagem que outras câmeras sCMOS não possuem em muitos aspectos. Portanto, a aquisição de imagens pode ser realizada com menor intensidade de iluminação e menor tempo de exposição, por um período mais longo, sem causar fotodanos ou fotobranqueamento das amostras.

Fonte de referência

Wu Y, Ali MRK, Dong B, Han T, Chen K, Chen J, Tang Y, Fang N, Wang F, El-Sayed MA. A terapia fototérmica com nanobastões de ouro altera as junções celulares e a rede de actina, inibindo a migração coletiva de células cancerígenas. ACS Nano. 2018 Sep 25;12(9):9279-9290. doi: 10.1021/acsnano.8b04128. Epub 2018 Aug 27. PMID: 30118603; PMCID: PMC6156989

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